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淺淡檢查儀器及應(yīng)用

作者：江蘇消防檢測設(shè)備來源：http://www.69qo.com/發(fā)布時間：2020-08-20 16:03:34

一個實驗室測定結(jié)果的可靠性是由其精密度、準確性及可比性所決定的，一般必需從下面幾方面著手。

一．選好測定方法；

二．購買質(zhì)量過硬的試劑盒；

三．要有質(zhì)優(yōu)的測試儀器；

四．必需進行正確的校準；

五．還要規(guī)范化操作；

六．搞好過硬的室內(nèi)質(zhì)量控制；

七．積極參加室間質(zhì)評活動；

八．還要有一支素質(zhì)高的隊伍。

現(xiàn)就生化分析儀檢查儀器的校準問題提出個人看法。

一、校準的重要性和必要性

首先必須明確生化分析儀不論如何先進，它還是一個比較器，它測試出來的標本結(jié)果是隨著標準限的設(shè)置不同而變化的。所以，在衛(wèi)生部臨床檢驗中心擬定的“臨床實驗室（定量測定）室內(nèi)質(zhì)控工作指南”中明確指出“對測定標本的儀器一定要求進行校準，校準時要選擇合適的（配套的）標準品/校準品；如有可能，校準品應(yīng)能溯源到參考方法或/和參考物質(zhì)；對不同的分析項目要根據(jù)其特性確立各自的校準頻率。”這說明校準儀器是室內(nèi)質(zhì)控的重要部分，強調(diào)了校準工作的必要性和重要性，同時指出了校準的方法和要求。

二、確立測定系統(tǒng)的概念

對于一個臨床檢測項目，如果所用方法的測定原理、試劑、儀器、校準品中任何一個不同，都可能得到不同的測定結(jié)果。因此，測定系統(tǒng)包括測定原理、試劑、儀器、校準品四要素。如果我們想要得到準確可靠的測定結(jié)果，而該結(jié)果又具有與國際、國內(nèi)其他實驗室的可比性，應(yīng)該自己建立一個標準測定系統(tǒng)。在全自動生化分析儀上使用配套的試劑和標準品，即日立7170使用寶靈曼的試劑和校準品（c.f.a.s），在貝克曼CX-7生化分析儀上使用貝克曼的試劑和校準品等。各儀器廠家均有自己的標準測定系統(tǒng)。對于校準品不能亂用，如絕對不能用貝克曼的校準品校準日立生化儀，同樣也不能用寶靈曼的校準品去校準貝克曼生化儀。

三、校準品和質(zhì)控品

校準品（Calibration materials）含有已知量的欲測物，用以校準該測定方法的數(shù)值，它與該方法及試劑、儀器是相關(guān)聯(lián)的。校準品的作用是為了減少或消除儀器、試劑等造成的系統(tǒng)誤差。因此最好為人血清基質(zhì)，以減少基質(zhì)效應(yīng)造成的誤差。

質(zhì)控品（Control materials）只用于和待測標本同時測定的，為了控制標本的測定誤差，因此要求保存時間十分穩(wěn)定。前者是校準其值而后者是控制誤差用的。

四、校準前準備

1 .了解燈泡已使用多久？檢查飄移是否合乎要求；

2．檢查比色杯的清潔及磨損情況？必要時進行更換；

3．用清潔劑泡洗管道

4．測定儀器的精密度及線性是否達到儀器性能要求？

五、定值質(zhì)控血清是否可以校準檢查儀器？

我們在相同條件下，同時用五個進口產(chǎn)品，每家兩種不同濃度的定值如TP、ALB、UREA、UA、ALP、GGT、CK、HBDH、LD、AMY等，在日立7170A上進行測定(用常規(guī)試劑)，詳見質(zhì)控血清對部份常規(guī)測定項目（如T、ALB、UREA、Cr、UA、K、Na、Cl、AST、ALT）結(jié)果與靶值比較：

表不同廠家定值質(zhì)控對TP、ALB、、AST、ALP結(jié)果與靶值

* 從總蛋白結(jié)果來看RANBOX與Bio-Red 相差為6.45%，而寶靈曼與Bio-Red 較為接近；

* 從白蛋白結(jié)果分析，寶靈曼與Bio-Red相對相差5.75%，與總蛋白結(jié)果明顯不同。Bio-Red則與汽巴康寧比較接近。

* UREA結(jié)果中凡是高值均上不去，分析其原因很可能與我們采用試劑盒的質(zhì)量有關(guān)，所以試劑盒的線性范圍理應(yīng)成為選擇試劑盒的重要依據(jù)之一。但從低值結(jié)果分析，也有5%的偏差（Bio-Red與Human）

* AST與ALT測定值均低于靶值，這就涉及我們選用什么K值問題。

* ALP測定中RANDOX（-16.6%）與寶靈曼（2.7%）靶值之間竟相差19.3%，這可能涉及試劑盒選用緩沖液種類，PH值以及所用ε值等有關(guān)。

通過上述結(jié)果比較，說明不同廠家生產(chǎn)的定值質(zhì)控血清靶值之間有的相差較大，提示我們決不能用定值質(zhì)控血清代替校準品作校準用。

六、校準方法

例如日立(Hitachi)系列您必須購買寶靈曼(Boehringer)的試劑及其校準的說明書設(shè)置參數(shù)，用c.f.a.s.校準血清進行校準，即可獲得各項目的校準K值，同時觀察一下各項目測定時反應(yīng)進程圖，檢查各項目參數(shù)設(shè)置是否在最佳位置，如不在最佳位置應(yīng)予以重新設(shè)置并測定。此時得到的K值即為準確的校準K值，然后測定待測的10至20份新鮮血清三次取其平均值，應(yīng)該說此結(jié)果是用Hitachi-Boehringer檢測系統(tǒng)所獲的測定值。然后用此血清值校準其它測定系統(tǒng)。

表日立7170、BM試劑連續(xù)四個月每天進行校正(n=81)K值的變化

七、關(guān)于酶活性測定校準問題

有的主張不進行校準而采用固定K值，有的作者以為應(yīng)該進行校準。酶活力計算公式如下：

酶活力（u/l）=△A/min×V×106/(ε×v×1)

令k=V×106/（ε×v）

則酶活力（u/l）=△A/min×k

常用K值有以下幾種：

a) 理論K值：根據(jù)理論摩爾消光系數(shù)（ε）來計算，如NADH為6.22×103

b) 實測K值：由于儀器波長的精密及半寬度不同，而應(yīng)根據(jù)實測ε值來設(shè)定K值

c) 廠家給的K值：廠家生產(chǎn)試劑盒說明書上提供的K值（有的廠家提供6.3×103）

d) 校準K值：通過校準物直接校準得到的K值

在日立7170A全自動生化分析儀上，可以得到幾種不同的酶K值，見下表

表日立7170A全自動生化分析儀上用不同方法得到幾種酶的K值

注：1校準物為寶靈曼c.f.a.s，試劑也用寶靈曼的配套試劑。

2括號內(nèi)數(shù)字是該K值與理論K值相比的變化率

以上摘自張克堅文章中

* 從上述K值中不難發(fā)現(xiàn)實測K值大于理論K值，這說明生化分析儀的測光系統(tǒng)還存在著一定誤差，如波長、半寬度及光徑等偏差，使儀器達不到理論上的最佳狀態(tài)；

* 校準K值與實測K值之間也存在一定的差距，即使指示物和儀器相同，其差異可能由試劑及校準品造成的；

* 作者認為最好使用校準K值，但必須由兩個先決條件：1必須使用配套的試劑；2必須使用配套的高質(zhì)量的校準品，但校準K值應(yīng)有其溯源性。

關(guān)于酶活標準品，歐洲標準局（BCR）和美國國家標準技術(shù)研究院（NIST）均發(fā)表了人血清基質(zhì)的酶活性標準物，相信不久將會有公認的標準（校準）品問世。

八、必須擬訂校準計劃（文件）

校準工作不是僅進行一次就可萬事無憂一勞永逸，而必須經(jīng)常化。按照“臨床實驗室質(zhì)量控制（QC）的要求（草案）”必須要求擬定校準計劃，其內(nèi)容包括：

1．建立校準方法

⑴選擇合適（配套）的校準品，包括校準品數(shù)目、類型和濃度；

⑵如有可能校準品應(yīng)溯源到參考方法或參考物質(zhì)；

⑶確定校準的頻度。至少每六個月進行一次校準；

⑷如有下列情況發(fā)生時，必須進行校準

* 改變試劑的種類，或者批號更換了。如果實驗室能說明改變試劑批號并不影響結(jié)果的范圍，則可以不進行校準；

* 儀器或者檢驗系統(tǒng)進行一次大的預(yù)防性維護或者更換了重要部件，這些都有可能影響檢驗性能；

* 質(zhì)控反映出異常的趨勢或偏移，或者超出了實驗室規(guī)定的接受限，采取一般性糾正措施后，不能識別和糾正問題時；

2．每個實驗室檢驗儀器必需要有校準計劃。每次校準必須有詳情的記錄和分析。每次校準記錄必須保存?zhèn)洳椤?/span>

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